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标识符 CSTR:16397.09.0L01001134
资源中文名称 人结肠癌细胞CACO-2红色荧光标记肿瘤模型
资源英文名称 CACO-2-DsRed
疾病概述 结肠腺癌是结肠腺上皮来源的常见消化道恶性肿瘤,属于结肠癌多种病理类型中的一种。
实验动物背景信息

BALB/cA-nu小鼠,胸腺缺失,为第11对染色体隐性遗传,T细胞免疫缺陷,B细胞正常,具有较高的NK细胞活力,无接触GFP敏感性,无移植排斥反应。

模型制作方法

制作稳定高表达DsRed的细胞,在荧光显微镜下呈强荧光,并且荧光均匀分布于整个细胞内,传代数次后仍能稳定高水平表达DsRed(图1)。细胞形态和未转染细胞无明显区别。

图1红色荧光标记的CACO-2肿瘤细胞

模型制作采用BALB/cA-nu裸小鼠,鼠龄6周,体重16—20 g。 BALB/cA-nu裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的CACO-2-DsRed肿瘤细胞,稀释至5×106cells/mL。取200μL细胞悬液进行皮下注射接种。

模型表型数据

分别在接种的7、14、21、28和35 d观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到接种部位肿瘤发光,通过肿瘤组织发出的荧光的光子数可以确定肿瘤的大小,随着观察天数的增加,肿瘤的体积和发光强度增加 (图2)。28天后肿瘤中心区域荧光降低,显示肿瘤中心出现坏死。以肿瘤细胞发射的光子数对小鼠荷瘤时间作图,得到红色荧光蛋白标记CACO-2的肿瘤细胞在裸鼠体内的生长曲线(图3)。

图2 皮下接种CACO2-DsRed肿瘤生长影像分析

图3 荧光标记肿瘤的生长曲线

动物模型的评价与验证
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