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标识符 CSTR:16397.09.0C01000897
资源中文名称 人结直肠癌细胞HCT-116红色荧光标记肿瘤模型
资源英文名称 HCT-116-DsRed
疾病概述 结直肠癌是常见的恶性肿瘤,包括结肠癌和直肠癌。结直肠癌癌的发病率从高到低依次为直肠、乙状结肠、盲肠、升结肠、降结肠及横结肠,近年有向近端(右半结肠)发展的趋势。其发病与生活方式、遗传、大肠腺瘤等关系密切。
实验动物背景信息

BALB/cA-nu  BALB/cA-nu小鼠,胸腺缺失,为第11对染色体隐性遗传,T细胞免疫缺陷,B细胞正常,具有较高的NK细胞活力,无接触敏感性,无移植排斥反应。

模型制作方法

人结直肠癌细胞(HCT116)是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性结直肠癌细胞系之一,形成上皮样的肿瘤,转染稳定高表达DsRed的细胞,在荧光显微镜下呈强荧光,并且荧光较均匀的分布于整个细胞内。细胞形态和未转染细胞无明显区别。

 

图1红色荧光标记的HCT-8细胞系

模型制作采用BALB/cA-nu裸小鼠,鼠龄5周,体重15—18 g,裸小鼠在实验室无特定病原体饲养间饲养。收集处于生长对数期的DsRed标记的HCT116肿瘤细胞,稀释至5×106cells/mL。取200μL细胞悬液进行皮下接种。

模型表型数据

在接种的7、14、21、28、35d观察肿瘤的生长情况。在接种的第7天就可以观察到肿瘤荧光,通过肿瘤组织发出的荧光的光子数确定肿瘤的大小,随着观察天数的增加,肿瘤的体积和发光强度增加,且具有很好的相关性(图2)。以肿瘤细胞发射的光子数对小鼠荷瘤时间作图得到红色荧光蛋白标记的肿瘤细胞在裸鼠体内的生长曲线(图3)。

图2.皮下接种CT-116-DsRed肿瘤生长影像分析

图3.红色荧光标记肿瘤的生长曲线

动物模型的评价与验证
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