心脏特异D173L转基因小鼠扩张型心肌病模型-

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标识符	CSTR:16397.09.0I01001209
资源中文名称	心脏特异D173L转基因小鼠扩张型心肌病模型
资源英文名称
疾病概述	扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）是一种原因未明的原发性心肌疾病。本病的特征为左或右心室或双侧心室扩大，并伴有心室收缩功能减退，伴或不伴充血性心力衰竭。DCM属于一种常见心肌疾病类型,患者病情通常包括特发性、家族性、遗传性、病毒性及免疫性等［1］。病情会呈进行性加重趋势,通常伴有心力衰竭、心律失常、血栓栓塞及猝死等。
实验动物背景信息	D5F173L转基因多巴胺小鼠模型。背景品系为C57BL/6小鼠，属于动物界、脊索动物门、脊椎动物亚门、哺乳纲、啮齿目、鼠科、家鼠属、家鼠种的动物，1921年立特(Little)用艾比·拉特洛坡(Abby Lathrop)的小鼠株，雌鼠57号与雄鼠52号交配而得C57BL，1937年从C57BL分离出C57BL/6亚系培育而成。
模型制作方法	由美国乔治敦大学Pedro A. Jose博士惠赠的pcDNA-h-D5F173L表达载体人D5F173L质粒，转化入大肠杆菌JM109，摇菌扩增后测序，测序结果经Blast分析，显示得到的pcDNA-D5-F173L与Genebank 中序列对比得到目的突变位点正确。用显微注射法将连接MHC启动子的转基因载体注射到C57BL小鼠的受精卵中，用C57BL小鼠作假孕受体，制备转基因小鼠。转基因小鼠用碱裂解法提取基因组DNA。PCR法鉴定转基因首建鼠及其子代基因型。
模型表型数据	1.多巴胺D5受体D5F173L转基因小鼠心脏超声结果心脏超声，主动脉瓣血流多普勒频谱图像:显示小鼠左心室结构，获得左心室运动曲线，主动脉瓣血流频谱图像。 1.1 左心室内体积分析显示：D5F173L转基因小鼠舒张末期和收缩末期左室内体积均明显低于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs D5WT，阴性对照，n=6，t test)，提示多巴胺D5突变基因173L(D5F173L)转基因小鼠血压升高后可引起心脏继发性左心室室腔增大。图1.四月龄至六月龄多巴胺D5突变基因F173L(D5F173L)，S390G(D5S390G)及正常人D5基因(hD5WT)（对照）转基因小鼠舒张末期和收缩末期左室内体积比较： A:四月龄舒张末期和收缩末期左室内体积比较。 B:五月龄舒张末期和收缩末期左室内体积比较。 C:六月龄舒张末期和收缩末期左室内体积比较。 1.2 舒张末期左室内径，左室前后壁及左室收缩功能相关性分析显示： a）左室内径变化：四到六月龄D5F173L转基因小鼠舒张末期左室内径均明显低于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT，阴性对照，n=6，t test)； b)左室前壁变化：D5F173L转基因小鼠舒张末期左室前壁与hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠相比四月龄无显著性变化，五月龄及六月龄明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.05 vs. hD5WT，阴性对照，n=6，t test)； c)左室后壁变化：四到六月龄D5F173L转基因小鼠舒张末期左室后壁均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT，阴性对照，n=6，t test)； d）舒张末期左室内体积：D5F173L转基因小鼠随月龄的增加均呈显著性减小的趋势且具有统计学意义（P<0.05，n=6，t test）。 1.3 收缩末期左室内径，左室前后壁及左室收缩功能相关性分析显示： a)内径变化：四到六月龄D5F173L转基因小鼠收缩末期左室内径均明显低于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT，阴性对照，n=6，t test)； b)前壁变化：D5F173L转基因小鼠收缩末期左室前壁与hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠相比四月龄无显著性变化 (* P>0.05 vs. hD5WT，阴性对照，n=6，t test)；五月龄及六月龄D5F173L转基因小鼠收缩末期左室前壁均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT，阴性对照，n=6，t test)； c)后壁变化：四到六月龄D5F173L转基因小鼠收缩末期左室后壁均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠 (* P<0.01 vs. hD5WT，阴性对照，n=6，t test)； d)收缩末期左心室内体积： D5F173L转基因小鼠随月龄的增加显著减小（P<0.05，n=6，t test）。 1.4 左心室缩短分数： D5F173L转基因小鼠左心室缩短分数四至六月龄均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠，且随月龄增加差异显著性增加(* P<0.01 vs. D5WT，阴性对照，n=6，t test) 。 1.5 左心室重量：D5F173L转基因小鼠左室重量四至六月龄均明显高于hD5WT转基因小鼠及非转基因小鼠，且随月龄增加差异显著性增加(* P<0.05 vs. D5WT，阴性对照，n=6，t test)， 2. 心脏组织病理切片HE染色及马松染色结果：多巴胺D5突变基因F173L(D5F173L)转基因小鼠心腔和心室较正常人D5基因(hD5WT)（对照）转基因小鼠显著增大，心肌细胞间隙增大，心肌纤维化加重。图2.多巴胺D5突变基因DF173L及正常人D5基因(hD5WT)心脏特异转基因小鼠心组织HE染色及马松染色结果
动物模型的评价与验证
保存方式	活体保存
合作方式
相关文章	1. Over-expression of a cardiac-specific human dopamine D5 receptor mutation in mice causes a dilated cardiomyopathy through ROS over-generation by NADPH oxidase activation and Nrf2 degradation.Redox Bio. 1.Liu W，Li WM，Gao C，et al. Effects of atorvastatin on the Th1/Th2 polarization of ongoing experimental autoimmune myocarditis in Lewis rats. J Autoimmun，2005，25(4):258-263. 2.Haasken S，Auger JL，Binstadt BA. Absence of β 2 integrins impairs regulatory T cells and exacerbates CD4 + T cell-dependent autoimmune carditis. J Immuno1，2011，187(5):2702-2710. 3.魏琦萍,符晓丁. 超声心动图联合心电图检查诊断扩张型心肌病的应用效果 . 中国医疗器械信息,2018，24(20):128-129. 4.姚钱晶,李娅,曹小俊,等. 探讨彩色多普勒超声对扩张型心肌病与缺血性心肌病的诊断价值 . 当代医学,2018，24(14):81-83. 5.金红瑞,张文博,王可颜,等 . MRI 在评估原发性扩张型心肌病患者心室功能中的应用 . 中国 CT 和 MRI 杂志,2018，16(5):63-65，73. 6.Jose PA,Eisner GM，Felder RA. Role of dopamine receptors in the kidney in the regulation of blood pressure [J]. Curr Opin Nephrol Hypertens，2002，11:87-92 7.Hussain T，Lokhandwala MF. Renal dopamine receptor function in hypertension [J]. Hypertension，1998，32: 187-197.
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